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hTERT,siRNA抑制胆囊癌细胞端粒酶活性及增殖运动的研究

作者:网络
来源:论文网
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加入时间:2008-04-21
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    1.2.7 琥珀酸脱氢酶(SDH)活性

    (1)细胞培养及基因转染同前。(2)于37℃、5%CO2培养箱中培养6h后收集细胞。(3)消化培养细胞、计数。96孔板分别加入200μl细胞悬液,按5×103/孔接种,每个浓度重复3次,培养48h后,换DMEM维持液(1%FBS)及MTT,MTT终浓度为0.5mg/ml,37℃、5%CO2条件下培养4h,弃上清,加DMSO 100μl/孔,吹打反应4~5min,置酶标仪570nm处测OD值。

    1.2.8 细胞增殖计数

    (1)取指数增殖期细胞5×104接种于6孔板中,培养48h,基因转染同前。每个浓度重复3次。(2)于37℃、5%CO2条件下培养48h后收集细胞,计算活细胞数,取平均值。

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