HPLC法测定牛黄清胃丸中大黄素和大黄酚的含量

    2.6  稳定性试验

    取同一供试品溶液，在0、6、1、24、48 h分别进行测定，峰面积结果，大黄素峰面积的RSD为0.6%，大黄酚峰面积的RSD为0.8%(n=5)。

    2.7  重复性试验

    取供试品（批号6015504）共5份，分别按“2.2.2”方法制备供试品溶液，进行测定，求得大黄素含量的RSD为1.6%，大黄酚含量的RSD为1.3%(n=5)，表明重复性较好。

    2.8  加样回收率试验

    精密称取已知含量的样品（批号6015504，大黄素含量0.066mg·g-1，大黄酚含量0.098 mg·g-1，平均丸重2.940g·丸-1）适量，共6份，分别置烧杯中，分别精密加入大黄素对照品贮备液（0.1004mg·ml-1）、大黄酚对照品贮备液（0.1002 mg·ml-1）3.5及4.5 ml各适量，按 “2.2.2供试品溶液的制备”方法操作，依法测定，结果见表1[3]。表1  大黄素、大黄酚加样回收率试验

    2.9  样品含量测定

    分别精密吸取供试品溶液与对照品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定三批样品中大黄素、大黄酚峰面积，按外标法计算其含量（n=5），结果见表2。 表2  3批样品含量测定结果（

    3  讨论

    3.1  试验中曾试用过流动相：甲醇-0.05%高氯酸溶液（73：27）[4]，后又反复试用过不同比例的甲醇和不同浓度的磷酸溶液作为流动相进行分离，结果甲醇-0.1%磷酸溶液（80：20，V/V）能使样品峰与相邻杂质峰达到基线分离。

    3.2  通过对3批样品中大黄素、大黄酚的测定，结果表明大黄素最高含量为0.41mg·丸-1，最低为0.33mg·丸-1；大黄酚最高含量为0.64 mg·丸-1，最低为0.52mg·丸-1。综合考虑确定限量，每丸含大黄素不得低于0.25mg，含大黄酚不得低于0.30mg。

    3.3 本方法结果准确，方法简便，重复性及回收率均理想，可以作为该制剂的质量控制方法。

【参考文献】
  [1] 卫生部药品标准中药成方制剂[S]．第七册．1993，25．

[2] 中国药典[S]．2005年版，一部．613．

[3] 杨珺，王世岭，郭晓华，等．HPLC法测定复方苦参凝胶剂中苦参碱与辣椒碱的含量[J]．中国药师，2005，8（8）：633～634．

[4] 原永芳，刘爱波，金山丛，等．新脂康口服液中大黄素和大黄酚的HPLC法定量分析[J]．中国药师，2004，12（12）：940～942．