表1 扶正解毒汤血清对染镍16HBE内自由基含量变化的影响（略）
注：与阴性对照组比较，a Ｐ＜005；与NiSO4组比较，b Ｐ＜005，c Ｐ＜001
A：NiSO4组 B：扶正解毒汤+NiSO4(Ⅰ)组 C：扶正解毒汤+NiSO4(Ⅱ)组
图1 LSCM下16HBE细胞内D399荧光强度(×40)（略）
23 实时定量PCR反应的标准曲线分析 hMTH1和βactin定量标准曲线的斜率分别为-10388和-11021，r2分别为09990和09966。表明线性关系良好，在实验浓度范围内能够进行准确定量。
24 扶正解毒汤血清对染镍细胞８oxodGTPase(hMTH1 mRNA)表达的影响(表2) 与阴性对照组比较，NiSO4染毒组细胞８oxodGTPase表达明显增强(RSD=58%)，且空白血清对此结果无影响；而扶正解毒汤+NiSO4Ⅰ组、扶正解毒汤+NiSO4Ⅱ组细胞８oxodGTPase表达水平则明显低于NiSO4组(RSD分别为67%，63%)。
3 讨论
８oxodGTPase由hMTH1基因编码，可催化DNA氧化损伤产物8羟基2脱氧鸟苷三磷酸(８oxodGTP)的水解，从而阻止后者向DNA的错误掺入，减少突变。故被视为一种内源性抗氧化、抗突变酶〔6〕，又可作为一种氧化应激的标记物〔3〕。镍化合物可通过诱导氧化应激等途径产生一系列细胞遗传毒性，甚至癌变〔7，8〕。本研究发现，NiSO4(800μmol/L)暴露16HBE细胞16h，其自由基含量及８oxodGTPase表达均明显增强，间接证实了镍暴露16HBE细胞内氧化应激的存在，同时也证明了８oxodGTPase作为氧化应激标记物的作用。16HBE细胞经扶正解毒汤血清与NiSO4共同处理后，其自由基明显降低，而８oxodGTPase的表达水平则无明显增加。提示扶正解毒汤可能通过预防或直接清除方式而减少染镍细胞内自由基的产生，发挥体外抗氧化作用，此与体内实验结果一致〔９，１０〕。同时亦可认为，扶正解毒汤与NiSO4共处理组细胞内８oxodGTPase表达的下调，并非扶正解毒汤血清直接作用的结果，而正是由于扶正解毒汤对ROS迅速而有效的清除，使得该氧化应激标记物的“预警”效应处于低或不应答状态，从而反证了扶正解毒汤的抗氧化作用。有关扶正解毒汤抗镍暴露氧化损伤的具体机制还需进一步探讨。
表2 不同处理组细胞hMTH1 mRNA表达的相对量比较（略）
注：与阴性对照组比较，a RSD=58%；与NiSO4组比较，b RSD=67%，c RSD＝63%
【参考文献】
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〔9〕 吕晓云，赵健雄，朱玉真，等.中药对镍暴露者肝损伤时脂质过氧化作用的研究［J］.中华实用中西医杂志，2003，16(1)：109-111.
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