表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)抗肿瘤研究进展

    信号传导是细胞外因子通过受体（膜受体或核受体）结合，引发细胞内一系列的生物化学反应直至细胞生理所需基因的转录表达开始的过程。信号传导的经典途径为细胞外因子、受体、连接蛋白、G蛋白、第二受体、胞内激酶、核受体。在肿瘤细胞中由于基因调控紊乱，可以导致细胞信号传导网络的异常，使细胞处于失控性生长状态。细胞内最重要的激酶链系统是丝裂原活化蛋白激酶通路(mitogen-activated protein kinase pathway，MAPK pathway)，其中研究得最充分的是Erk，JNK/SAPK和p38三条通路。Jee Y.Chung对转染了突变H-ras基因的鼠表皮细胞JB6细胞株研究发现，EGCG能抑制Raf-1与MEK1的结合，下调Erk1/2与MEK1/2蛋白的磷酸化，从而抑制Ras-MAPK信号通路的传导[21]。Choi YJ研究发现在EGCG与钒酸盐共同作用诱导U937细胞发生的凋亡中，Erk信号通路扮演着重要角色[22]。Saeki K对人白血病U937和OCI-AML1a细胞研究发现EGCG可作用于JNK和p38信号传导通路，通过活化caspase-3、caspase-9以及MKK3/6、MKK4、ASK1、JNK1等诱导肿瘤细胞凋亡[23]。对人表皮癌细胞A431研究显示，EGCG能抑制酪氨酸蛋白激酶（PTK）对EGF-R,PDGF-R和FGF-R的作用，从而阻断细胞外生长因子与其相应受体的结合，从而阻断其生长信息的传递。

    2.4 抑制肿瘤细胞侵袭和转移

    肿瘤转移是指恶性肿瘤细胞脱离原发肿瘤，通过各种方式转移到其他组织或器官继续生长，形成与原发肿瘤相同性质的继发性肿瘤的过程。肿瘤转移是恶性肿瘤的基本特征，是临床肿瘤患者主要致死原因。肿瘤新生血管的形成是肿瘤侵袭、转移的必要条件。血管内皮生长因子（VEGF）具有较强的刺激血管形成的作用。Jung YD发现EGCG能抑制人结肠癌HT-29细胞中VEGF的表达。对接种了瘤细胞的BALB/C裸鼠腹腔内注射EGCG，与对照组相比微血管密度降低30%,据此认为EGCG能通过抑制血管形成发挥抗癌效应[24]。EGCG能通过多种途径抑制肿瘤新生血管的形成。EGCG能够通过增强血管平滑肌中p53的稳定性以及NFкB复合物形成的途径引起增殖的血管平滑肌细胞凋亡。细胞外基质和基底膜的降解和破坏是肿瘤转移多阶段过程中的重要步骤。在人纤维肉瘤HT-1080细胞中，EGCG能抑制膜类基质金属蛋白酶1（MT1-MMP）活性从而导致基质金属蛋白酶-2在细胞表面积聚[25]。这可能是EGCG抑制肿瘤细胞侵袭的作用机制。有研究表明EGCG能抑制VEGF与其受体结合，从而抑制肿瘤形成新生毛细血管，达到抑制肿瘤细胞侵袭的作用[26]。慢性淋巴细胞白血病B细胞(CLL B cells)能表达VEGF膜受体，并且合成和释放VEGF。Lee YK 用EGCG处理CLL B细胞后发现VEGF受体(VEGF-R1、VEGF-R2)磷酸化受到抑制，从而阻断CLL B细胞通过自分泌途径刺激增殖，从而导致肿瘤细胞死亡[27]。 2.5 其他作用机制

    2.5.1 抗氧化作用

    人类重大疾病（肿瘤、心血管）和衰老均与体内自由基生成过多有密切的关系。自由基是一类寿命很短，但是性质非常活跃且具有单个不成对电子的化学基团。自由基的大量出现是致癌机制之一。它可以凭借其亲电子本性与一些大分子化合物相结合，成为潜在的致癌因素。因此对自由基的清除效应是抗癌、抗突变的重要机制之一。在正常生理条件下，生物体内自由基不断产生，也不断被清除。处于平衡状态的自由基浓度是很低的。但在某些情况下，自由基的产生和清除失去平衡，往往是自由基的浓度增高到损伤机体的程度。自由基的形成大多是内源性的。吸烟、空气污染、紫外线辐射以及人体免疫功能低下均会诱导自由基的形成。茶叶中富含的多酚类化合物具有很活跃的羟基氢，能提供活跃的氢与自由基反应，生成惰性产物或较稳定的自由基，因而中断或减慢自由基参与的反应。陈留记等采用电子自旋共振技术和化学发光法，利用体外黄嘌呤（X）/黄嘌呤氧化酶（XO）、Fenton反应及促癌剂PMA刺激人多形核白细胞（PMN）呼吸爆发产生活性氧自由基模型。研究表明，茶多酚及其单体对氧自由基的清除率可达98％，在一定浓度范围内呈量效关系，且均优于传统的抗氧化剂维生素C、维生素E等[28]。研究表明，绿茶及其提取物均具有较强的清除氧自由基活性，而EGCG是其提取物中抗自由基活性最强的成分[29，30]。这可能是EGCG抗肿瘤的重要机制之一。

    2.5.2 抑制端粒酶活性

    端粒(telomere)是真核细胞线形染色体末端由端粒DNA和端粒蛋白质构成的一种特殊结构。在正常情况下，随着细胞分裂，端粒进行性缩短并诱发一系列分子事件，最终导致细胞凋亡。端粒酶是一种能延长端粒末端的核糖蛋白酶，主要成分是RNA和蛋白质。近年来人们在较多永生化细胞株及大多数肿瘤组织中检测到活化状态的端粒酶，而绝大多数正常组织中端粒酶为阴性。因此认为端粒酶的激活与恶性肿瘤的发生、发展密切相关。Mittal A研究人乳腺癌MCF-7细胞发现，EGCG能通过抑制人端粒酶催化亚单位hTERT(human telomerase reverse transcriptase)而抑制乳腺癌细胞中端粒酶的表达[31]。

    3 问题与展望

    茶作为一种古老的饮料至今仍广为流传。随着现代研究的深入，绿茶及其提取物的实验研究揭示了它众多的功效，如抗氧化、清除氧自由基、预防肿瘤的发生、发展、抑制肿瘤细胞增殖。肿瘤的形成是一个多步骤、多因素、多阶段的过程。正常细胞恶化为肿瘤细胞涉及到多个癌基因、抑癌基因、生长因子及其受体、DNA修复基因等异常的积累。细胞的分裂、增殖、死亡均处于一个复杂的网络控制之中，这一网络中某些蛋白表达异常，均可能导致细胞增殖失控，发展成为肿瘤细胞。众多研究显示ECCG有可能从诱导凋亡、周期阻滞、信号传导、抑制肿瘤侵袭等众多方面做了阐述。因此对EGCG能抑制肿瘤细胞的增殖作用是较为肯定的。然而在众多的分子机制中，EGCG作用于肿瘤细胞是否存在特异性的靶蛋白，是否存在特异性的分子通路能够解释其对各种肿瘤细胞的抑制效应，尚有待于研究者继续努力。

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