雌激素受体αβ亚型及HPV16-L1E7 在宫颈病变组织中的表达

【关键词】  雌激素受体

　　【摘要】 目的 探讨雌激素受体的不同亚型（ERα、β）及人乳头状瘤病毒（HPV）在宫颈病变中的相互作用及其对宫颈病变的影响。方法 应用免疫组化两步法检测ERα/β亚型及HPV16-L1/E7蛋白在66例不同程度宫颈病变组织中的表达。结果 在宫颈癌组中，HPV16-L1（-）/HPV16-E7（+）者及ERβ阳性率高于非宫颈癌组，差异有显著性（P=0.019和P=0.029），并且HPV的表达状态与ERβ的表达相关。结论 ERβ可能通过影响HPV在宿主细胞中的感染状态对宫颈病变的发展起一定影响。

　　关键词 雌激素受体 人乳头状瘤病毒 宫颈病变 免疫组化

　    【Abstract】 Objective To investigate the expression and interaction between the two isoforms of the ER and HPV16in cervical lesions.Methods The immunohistochemistry method was used to study the expression ofαandβisoforms of ER and HPV16-L1/E7in66cases including chronic inflammation，atypical hyperplasia and invasive canˉcer of cervix.Results There were more ERβpositive cases and HPV16-L1（-）/HPV16-E7（+）cases in the carcinoma group（P=0.019and P=0.029），and the states of HPV expression was closely related to whether ERβpositive or not.Conclusion ERβmaybe affect the progression of cervical lesions by determining the infection state of HPV.

　　Key words human papillomavirus estrogen receptor cervical lesion immunohistochemistry  

　　宫颈癌是最常见的女性生殖系统恶性肿瘤，HPV特别是HPV16、18等高危型别感染是引起宫颈癌变的首要因素。但HPV感染并非诱发宫颈癌的唯一因素，尚需与其他因素协同作用才能导致宫颈恶性病变的发生。临床资料提示，HPV感染与雌激素及其受体在宫颈病变的发生发展中可能存在某些协同作用。本课题通过免疫组化方法研究ER的不同亚型及HPV的不同片断在宫颈正常上皮、非典型增生及宫颈癌上皮中的表达，探讨ER及HPV与不同程度宫颈病变的联系。

　　1 材料与方法

    1.1 标本收集 选取1998年1月～2002年9月间，我院妇科阴道镜下活检或手术切除获得的宫颈浸润癌、CIN及慢性宫颈炎组织共66例，其中宫颈浸润癌组织21例，CIN28例，慢性宫颈炎17例，年龄20～82岁，平均（42.96±16.38）岁。经10%甲醛固定后石蜡包埋，5μm连续切片。全部标本均经我院病理科诊断确诊。

    1.2 主要试剂 鼠抗人ERα单克隆抗体C-542:加拿大Stressgen公司生产。兔抗人ERβ多克隆抗体:美国Upstate公司生产。鼠抗人HPV16-E7单克隆抗体8C9:美国Zymed公司生产。鼠抗人HPV16-L1单克隆抗体CAMVIR-1:  美国Neomarkers公司生产。PV-9000免疫组化试剂盒:北京中山生物技术有限公司生产。宫颈癌SiHa细胞由香港科技大学梁纯博士馈赠。   

　　1.3 实验方法 参照PV-9000免疫组化试剂盒说明进行两步法免疫组化染色。实验中以PBS代替一抗作为阴性对照，并分别以MCF-7及SiHa细胞爬片染色作为ERα、ERβ和HPV16-E7、HPV16-L1的阳性对照。结果判定:光学显微镜下观察宫颈上皮细胞核内有棕黄色颗粒沉淀者为阳性，阴性结果细胞染色同背景（蓝紫色）。根据HPV表达情况分为三组:A组为HPV16-L1（-）/HPV16-E7（-）;B组为HPV16-L1（+）/HPV16-E7（+）;C组为HPV16-L1（-）/HPV16-E7（+）。

    1.4 统计学方法 采用SPSS10.0统计软件进行t检验、单因素方差分析、χ 2 检验及多因素相关分析等统计学分析。

    2 结果

    2.1 HPV在不同病变宫颈组织中的表达 在全部66例标本中，HPV16-L1表达阳性者30例，HPV16-E7阳性者45例（图1，图2）。并发现在HPV16-L1表达阳性的标本中，HPV16-E7亦均为阳性表达（B组），约占45.5%;HPV16-E7阴性者，HPV16-L1亦阴性（A组），约占31.8%;但在HPV16-E7阳性标本中则有一部分未见HPV16-L1的表达（C组），约占22.7%。以χ 2 检验统计宫颈不同程度病变组其免疫组化结果的差异。结果显示，在宫颈癌组中，HPV16-L1（-）/HPV16-E7（+）者（C组）占42.9%，而非宫颈癌组中仅占13.3%，差异有显著性（P=0.019），见
表1。

    表1 宫颈不同程度病变中ER 亚型及HPV16的表达情况 略

　　2.2 雌激素受体在不同病变宫颈组织中的表达 在全部标本中，ERα表达阴性者35例，阳性者31例，宫颈癌组中阳性率（38.1%）低于非宫颈癌组（51.1%），但其差异无显著性（P>0.05）。ERβ阴性者38例，阳性者28例，比较其在不同病变组所占比例，可见宫颈癌中阳性率为21.9%，明显高于非宫颈癌组（P=0.029，表1，图3，图4）。

    2.3 雌激素受体与HPV16表达状态的关系 比较在A、B、C组中，不同雌激素受体亚型所占比例，可见ERα与HPV16的表达状态无关（P>0.05）;而与HPV16-E7及HPV16-L1均阳性组（B组）相比，仅HPV16-E7阳性组（C组）中ERβ的表达率更高，差异有显著性（P=0.034，表2）。

　表2 ER亚型与HPV16表达的关系 略

　　以t检验比较ERβ阴性组平均年龄（40.85±14.47）岁略低于ERβ阳性组（46.00±18.70）岁，但无统计学意义（P=0.27）。以单因素方差分析比较A、B、C组的平均年龄，分别为（37.38±10.79）岁、（43.11±18.13）岁、（49.54±16.86）岁，虽有上升趋势，但差异无显著性（P>0.05）。

    以多因素相关分析比较ERβ及年龄因素对C组与其他病例的转贴于 酷文网-论文下载中心 http://www.coolwen.net